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液相色譜儀梯度異常原因及處理方法
更新時間:2016-11-27
瀏覽:2080次
液相色譜儀梯度
色譜圖出現(xiàn)保留時間變化、保留時間縮短、保留時間延長、出現(xiàn)肩峰或分叉、峰拖尾和峰展寬等異常時,原因及處理方法如下:
一、
液相色譜儀梯度
保留時間變化
1、柱溫變化:配置柱恒溫,必要時需配置恒溫箱。
2、等度與梯度間未能充分平衡:至少用10倍柱體積的流動相平衡柱。
3、緩沖液容量不夠:用大于25mmol/L的緩沖液。
4、柱污染:每天沖洗柱。
5、柱內(nèi)條件變化:穩(wěn)定進(jìn)樣條件,調(diào)節(jié)流動相。
6、柱快達(dá)到壽命:用保護(hù)柱。
二、
液相色譜儀梯度
保留時間縮短
1、流速增加:檢查泵,重新設(shè)定流速。
2、樣品超載:降低樣品量。
3、鍵合相流失:流動相PH值保持在3~7.5。
4、流動相組成變化:防止流動相蒸發(fā)或沉淀。
5、溫度增加:柱恒溫。
三、
液相色譜儀梯度
保留時間延長
1、流速下降:管路泄漏,更換泵密封圈,排除泵內(nèi)氣泡。
2、硅膠柱上活性點(diǎn)變化:用流動相改性劑(如三乙胺等)或堿致鈍化柱。
3、鍵合相流失:流動相PH值保持在3~7.5。
4、流動相組成變化:防止流動相蒸發(fā)或沉淀。
5、溫度降低:柱恒溫。
四、出現(xiàn)肩峰或分叉
1、樣品體積過大:用流動相配樣,總的樣品體積小于*峰的15%。
2、溶劑過強(qiáng):用較弱的溶劑。
3、柱塌陷或形成短路通道:更換色譜柱,采用較弱腐蝕性條件。
4、柱內(nèi)燒結(jié)不銹鋼失效:更換燒結(jié)不銹鋼,加在線過濾器,過濾樣品。
5、進(jìn)樣器損壞:更換進(jìn)樣器。
五、
液相色譜儀梯度
峰拖尾
1、柱超載:降低樣品量,增加柱直徑,用較高容量的固定相。
2、峰干擾:清潔樣品,調(diào)整流動相。
3、硅羥基作用:鈍化樣品。
4、死體積或柱外體積過大:連接點(diǎn)降至zui低,對所有連接點(diǎn)作適當(dāng)調(diào)整,盡可能采用細(xì)內(nèi)徑的連接管。
5、柱效下降:用較低腐蝕條件,更換柱,用保護(hù)柱。
六、峰展寬
1、進(jìn)樣體積過大。
2、在進(jìn)樣閥中造成峰擴(kuò)展:進(jìn)樣前后排出氣泡以降低擴(kuò)散。
3、數(shù)據(jù)系統(tǒng)采樣速率太慢:設(shè)定速率應(yīng)每峰大于10點(diǎn)。
4、檢測器時間常數(shù)過大:設(shè)定時間常數(shù)為感興趣*峰半寬的10%。
5、流動相粘度過高:增加柱溫,用低粘度流動相。
6、檢測池體積過大:用小體積檢測池,卸下熱交換器。
7、柱外體積過大:將連接管徑和連接管長度降至zui小。
8、保留時間過長。
9、樣品過載。
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